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亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)試劑盒微量法100管/96樣

  • 產品貨號:CS-01S63570
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100管/96樣
  • 采購熱度:1007
  • 庫存:20
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase  LAP)試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)試劑盒

微量法

100/96

CS-0163570

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量最為豐富。各類肝病患者因肝細胞損傷,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的檢測能從不同側面反映各種肝病的發生和發展。

商品介紹:

測定原理:

LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算LAP活性。

自備用品:

酶標儀/可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;

樣本的前處理:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為1000~50001的比例(建議2000萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

LAP測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至405nm,蒸餾水調零。

2、將試劑二轉移至試劑一中充分溶解(如較難溶解,可50℃水浴加熱約30min促進溶解);在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

3、在微量石英比色皿或96孔板中加入50μL樣本和150μL試劑一,混勻后立即記錄405nm處初始吸光值A1 2min后的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1。

注意事項:若ΔA大于0.5,需將酶液用提取液稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數。使A2-A1小于0.5,可提高檢測靈敏度。

LAP活力單位的計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=411.5×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷ (V樣×Cpr) ÷T=411.5×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=411.5×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAPnmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.206×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結果。

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賬 戶 名:上海生物

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